小鼠源性成分探針?lè)晒舛縋CR檢測(cè)試劑盒準(zhǔn)備試劑與收集血樣

瀏覽次數(shù)：1562發(fā)布日期：2021-07-27

小鼠源性成分探針?lè)晒舛縋CR檢測(cè)試劑盒準(zhǔn)備試劑與收集血樣：

雙重核酸試劑盒（熒光PCR法）　1. 收集標(biāo)本：血清、血漿（EDTA 、檸檬酸鹽、肝素抗凝）、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測(cè)， 2-8 ℃ 保存48 小時(shí)；更長(zhǎng)時(shí)間須冷凍（ -20 ℃或 -70 ℃ ）保存，避免反復(fù)凍融。

2. 標(biāo)準(zhǔn)品液配制：使用前加入0.5ml 蒸餾水混勻，配成 120 0ng/ml 的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn) 管 8 管，管加標(biāo)本稀釋液 900ul ，第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液 100ul 混勻后用加樣器吸出 500ul ，移至第二管。如此反復(fù)作對(duì)倍稀釋?zhuān)瑥牡谄?管中吸出 500ul 棄去。第八管為空白對(duì)照。

3. 10× 標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作 1: 1 0 倍稀釋?zhuān)?示例： 1ml濃稀釋液 +9ml 蒸餾水）。

4. 洗滌液：用重蒸水 1:20 稀釋?zhuān)ㄊ纠?ml 濃縮洗滌液加入 19ml 的重蒸水）

檢測(cè)程序：

1. 加樣：每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品 100ul ，將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。

2. 洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次，向?yàn)V紙上印干。

3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。

4. 洗板：同前。

5. 每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0 分鐘。

6. 洗板：同前。

7. 每孔加入底物工作液100ul ，置 37 ℃ 暗處反應(yīng)15 分鐘。

8. 每孔加入100ul 終止液混勻。

9. 30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在 45 0 nm 處測(cè) 吸光值。